霍乱毒素B亚单位CTB

2023-9-29 来源:本站原创 浏览次数:

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背景介绍

霍乱毒素B亚单位abs(CholeratoxinsubunitB,CTB),是由霍乱弧菌产生的外毒素、霍乱毒素的重要组成亚单位之一。霍乱毒素由两个亚单位组成,即A亚单位(CTA)和B亚单位(CTB)。A亚单位是霍乱毒素的活性部分,具有ADP核糖基转移酶活性,是毒素的活性中心;5个B亚单位(CTB)装配成五聚体,以高亲和力结合表达于有核细胞(包括上皮细胞,淋巴细胞和抗原呈递细胞等)细胞膜上的GM1神经节苷脂,为球形A亚单位结合细胞表面受体后内化所必须,常用于信号转导机制的研究,神经学研究的示踪、免疫佐剂等。霍乱毒素B亚单位处理的组织培养细胞不会死亡,动物组织也不会坏死。

CTB实验用途之逆行示踪:

CTB是目前应用最为广泛的一类逆行示踪剂,其通过与神经节苷脂GM1的戊多糖链结合,基于这一原理,使得CTB可以选择性地被那些富含神经节苷脂GM1的神经细胞所摄取,从而特异性地标记神经细胞,并且这种跨膜转运的方式不会影响细胞的形态学变化。通常情况下,CTB在使用前常需配置成1%的CTB磷酸盐缓冲液。起初CTB是作为非荧光示踪剂而被应用于逆行示踪技术中,荧光结合形式CTB的出现则让其逐渐转变为一种常用的荧光示踪剂。爱必信生物除可提供abs常规CTB产品外、也可提供absFITC标记的CTB产品。

CTB逆行示踪的文献分享:

NovelProjectionstotheCerebrospinalFluid-ContactingNucleusFromtheSubcortexandLimbicSysteminRat.FrontiersinNeuroanatomy.Aug20发表于FrontiersinNeuroanatomy的这篇文章,作者通过对SD大鼠脑脊液接触的核细胞注射逆行示踪剂CTB进行示踪,7-10天后对存活大鼠进行灌流,取全脑和脊髓切片进行CTB免疫荧光检测。荧光显微镜下观察下皮层和边缘系统中的CTB阳性神经元,并用软件进行了三维重建。充分识别观察脑脊液中含有的来自下皮层和边缘系统的核细胞,以便去理解这些核细胞的生物学功能。

Figure1InjectionsiteofcholeratoxinsubunitB(CTB)intothecerebrospinalfluid(CSF)-contactingnucleus(A,B).Whitearrow(↓):siteoftheCTBinjection.Aq,aqueduct.Bar=μm.

Figure2CellularmorphologyofthecholeratoxinsubunitB-positiveneurons.Therepresentativephotographswerecapturedfromtheanteriorolfactorynucleus(AO;A)claustrum(Cl;B)bednucleusofthestriaterminalis(BNST;C)andmagnocellularpreopticnucleus(MCPO;D).Bar=40μm.

CTB实验用途之免疫佐剂

霍乱毒素B亚单位(CTB)除去了CT的毒性,但是保留了强的免疫原性和佐剂活性,没有毒性的CTB在调节APC反应,T细胞反应和抗体的产生中具有重要的调节作用,并且在病毒疫苗、DNA疫苗和肿瘤和自身免疫病治疗疫苗研究中都取得了很大的进展。

CTB免疫佐剂文献分享:

发表于MucosalImmunology的这篇文章,作者为了分析CpGs对H9N2全灭活流感病毒的佐剂作用,分别用PBS、单独H9N2全灭活流感病毒或CpGs联合去免疫小鼠,作者同时选用了经典的粘膜佐剂CT及其B亚单位(CTB)免疫小鼠。研究发现,CpGs/CT/CTB+H9N2WIV诱导的血清抗原特异性IgG(图1a)、IgG1(图1b)和IgG2a/c(图1c)抗体滴度明显高于单纯抗原处理(P<0.01)。并且小肠(图1d)、气管(图1e)、肺(图1f)黏膜洗液IgA水平均增强。

Figure1CpGsassistH9N2wholeinactivatedinfluenzavirus(WIV)inenhancingthelocalandsystemicimmuneresponsesafteroralimmunizationinmice.Antigen-specificserum(a)IgGtiters,(b)IgG1titers,(c)IgG2a/ctiters,(d)mucosaIgAtitersinintestinalwash,(e)trachealwash,(f)lungwash.

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